一、中文名稱:昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)ELISA試劑盒

規(guī)格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:昆蟲ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研，不得用于臨床診斷。

保存及有效期:2-8℃，六個月

檢測樣本種類:用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。

臻科生物供應的種屬有：昆蟲、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、昆蟲、豬牛羊、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等。

二、實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)水平。用純化的昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入蛻皮激素(Ecdysone)，再與HRP 標記的蛻皮激素(Ecdysone)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛻皮激素(Ecdysone)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中昆蟲蛻皮激素(Ecdysone)濃度。
 

三、操作步驟：

1、準備試劑，樣品和標準品

2、加入準備好的樣品和標準品，37℃反應30分鐘

3、洗板5次，加入酶標試劑，37℃反應30分鐘

4、洗板5次，加入顯色A、B,37℃顯色10分鐘

5、加入終止液

6、15分鐘之內(nèi)讀OD值后計算

四、試劑盒組成：

五、試劑盒計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD 值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

六、注意事項：

1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3、各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4、請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值大于標準品孔di一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6、底物請避光保存。

7、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9、本試劑不同批號組分不得混用。

七、特別提醒：

1、標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2、不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。